Resistenza agli acidi nucleici e alla rifampicina del Mycobacterium Tuberculosis

Breve descrizione:

Questo kit è adatto per la rilevazione qualitativa del DNA di Mycobacterium tuberculosis in campioni di espettorato umano in vitro, nonché della mutazione omozigote nella regione del codone 507-533 del gene rpoB che causa la resistenza alla rifampicina da parte di Mycobacterium tuberculosis.


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Nome del prodotto

Kit HWTS-RT074B per la rilevazione della resistenza agli acidi nucleici e alla rifampicina del Mycobacterium Tuberculosis (curva di fusione)

Certificato

CE

Epidemiologia

Il Mycobacterium tuberculosis, noto anche come bacillo della tubercolosi (TB), è il batterio patogeno che causa la tubercolosi. Attualmente, i farmaci antitubercolari di prima linea comunemente utilizzati includono isoniazide, rifampicina ed esametolo. I farmaci antitubercolari di seconda linea includono fluorochinoloni, amikacina e kanamicina. Tra i farmaci di recente sviluppo si annoverano linezolid, bedaquilina e delamani. Tuttavia, a causa dell'uso scorretto dei farmaci antitubercolari e delle caratteristiche della struttura della parete cellulare del Mycobacterium tuberculosis, quest'ultimo sviluppa resistenza ai farmaci antitubercolari, il che rappresenta una seria sfida per la prevenzione e il trattamento della tubercolosi.

La rifampicina è ampiamente utilizzata nel trattamento dei pazienti affetti da tubercolosi polmonare dalla fine degli anni '70, con risultati significativi. È stata la prima scelta per abbreviare la durata della chemioterapia in questi pazienti. La resistenza alla rifampicina è principalmente causata dalla mutazione del gene rpoB. Nonostante la continua introduzione di nuovi farmaci antitubercolari e il miglioramento clinico nel trattamento della tubercolosi polmonare, la carenza di farmaci antitubercolari rappresenta ancora un problema, e il fenomeno dell'uso irrazionale dei farmaci in ambito clinico è piuttosto diffuso. È evidente che l'eliminazione completa del Mycobacterium tuberculosis nei pazienti affetti da tubercolosi polmonare non è sempre efficace, il che porta allo sviluppo di diversi gradi di resistenza ai farmaci, prolungando il decorso della malattia e aumentando il rischio di mortalità.

Canale

Canale

Canali e fluorofori

Tampone di reazione A

Tampone di reazione B

Tampone di reazione C

Canale FAM

Reporter: FAM, Quencher: Nessuno

rpoB 507-514

rpoB 513-520

38KD e IS6110

Canale CY5

Reporter: CY5, Estintore: Nessuno

rpoB 520-527

rpoB 527-533

/

Canale HEX (VIC)

Reporter: HEX (VIC), Quencher: Nessuno

controllo interno

controllo interno

controllo interno

Parametri tecnici

Magazzinaggio

≤-18℃ Al buio

durata di conservazione

12 mesi

Tipo di campione

Espettorato

CV

≤5,0%

LoD

micobatterio tubercolare 50 batteri/mL

tipo selvatico resistente alla rifampicina: 2x103batteri/mL

mutante omozigote: 2x103batteri/mL

Specificità

Rileva il Mycobacterium tuberculosis di tipo selvatico e i siti di mutazione di altri geni di resistenza ai farmaci come katG 315G>C\A, InhA-15C> T; i risultati del test non mostrano resistenza alla rifampicina, il che significa che non vi è reattività crociata.

Strumenti applicabili:

Sistemi PCR in tempo reale SLAN-96P

Sistema PCR in tempo reale BioRad CFX96

Sistema PCR in tempo reale LightCycler480®

Flusso di lavoro

Se si utilizza il kit Macro & Micro-Test General DNA/RNA (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (utilizzabile con l'estrattore automatico di acidi nucleici Macro & Micro-Test (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) o la colonna Macro & Micro-Test Viral DNA/RNA (HWTS-3022-50) di Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd. per l'estrazione, aggiungere in sequenza 200 μL di controllo positivo, controllo negativo e campione di espettorato trattato da analizzare, e aggiungere separatamente 10 μL di controllo interno al controllo positivo, al controllo negativo e al campione di espettorato trattato da analizzare. I passaggi successivi devono essere eseguiti rigorosamente secondo le istruzioni di estrazione. Il volume del campione estratto è di 200 μL e il volume di eluizione raccomandato è di 100 μL.


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