Kit per la rilevazione delle mutazioni KRAS 8 (PCR a fluorescenza)-RUO
Nome del prodotto
Kit per la rilevazione delle mutazioni KRAS 8 (PCR a fluorescenza)-RUO
Epidemiologia
Mutazioni puntiformi nel gene KRAS sono state riscontrate in diversi tipi di tumori umani, con una frequenza di mutazione di circa il 17%-25% nei tumori, del 15%-30% nei pazienti con tumore al polmone e del 20%-50% nei pazienti con tumore del colon-retto. Poiché la proteina P21 codificata dal gene K-ras si trova a valle della via di segnalazione dell'EGFR, dopo la mutazione del gene K-ras, la via di segnalazione a valle rimane sempre attiva e non viene influenzata dai farmaci mirati a monte sull'EGFR, con conseguente continua proliferazione maligna delle cellule. Le mutazioni nel gene K-ras conferiscono generalmente resistenza agli inibitori della tirosin chinasi dell'EGFR nei pazienti con tumore al polmone e resistenza ai farmaci anticorpali anti-EGFR nei pazienti con tumore del colon-retto [1, 2, 3]. Nel 2008, il National Comprehensive Cancer Network (NCCN) ha pubblicato una linea guida di pratica clinica per il cancro del colon-retto, che ha evidenziato come i siti di mutazione che causano l'attivazione di K-ras siano principalmente localizzati nei codoni 12 e 13 dell'esone 2, e ha raccomandato che tutti i pazienti con cancro del colon-retto metastatico avanzato possano essere sottoposti al test per la mutazione di K-ras prima del trattamento[4]. Pertanto, la rilevazione rapida e accurata della mutazione del gene K-ras è di grande importanza nella guida clinica alla terapia farmacologica. Questo kit utilizza il DNA come campione di rilevazione per fornire una valutazione qualitativa dello stato di mutazione, che può aiutare i medici nello screening dei pazienti affetti da cancro del colon-retto, cancro del polmone e altri tumori che possono beneficiare di farmaci mirati. I risultati del test del kit sono solo a scopo di riferimento clinico e non devono essere utilizzati come unica base per il trattamento individualizzato dei pazienti. I medici devono formulare giudizi completi sui risultati del test basandosi su fattori quali le condizioni del paziente, le indicazioni farmacologiche, la risposta al trattamento e altri indicatori di laboratorio.
Parametri tecnici
| Magazzinaggio | ≤-18℃ |
| durata di conservazione | 12 mesi |
| Tipo di campione | sezioni patologiche umane incluse in paraffina |
| CV | ≤5,0% |
| LoD | a) Il tampone di reazione K-ras A e il tampone di reazione K-ras B possono rilevare stabilmente un tasso di mutazione dell'1% in presenza di uno sfondo di tipo selvatico di 3 ng/μL; b) Una mutazione di 1×103È possibile rilevare stabilmente copie/mL in uno sfondo di tipo selvatico di 1×105Copie/mL quando il tasso di mutazione è dell'1%; c) Quando viene testato il riferimento LoD SW3 dell'azienda, non c'è alcun valore Ct o valore Ct=0 del tampone di reazione A e del tampone di reazione B |
| Strumenti applicabili | Sistemi PCR in tempo reale Applied Biosystems 7500, sistemi PCR in tempo reale Applied Biosystems 7300, sistemi PCR in tempo reale QuantStudio®5, sistema PCR in tempo reale LightCycler® 480, sistema PCR in tempo reale BioRad CFX96. |
Flusso di lavoro
Reagente necessario ma non fornito:Acqua priva di DNasi/RNasi, etanolo anidro. Quando si analizza un campione di tessuto incluso in paraffina, si raccomanda di utilizzare il kit QIAamp DNA FFPE Tissue Kit (56404) e il kit Paraffin-embedded Tissue DNA Rapid Extraction Kit (DP330) di Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd.
Materiali di consumo necessari ma non forniti:Punte senza DNasi/RNasi, guanti monouso, provetta da centrifuga senza DNasi/RNasi, strisce da 8 provette, centrifuga.
