Gene di resistenza ai carbapenemi (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
Nome del prodotto
HWTS-OT045 Kit di rilevamento del gene di resistenza ai carbapenemi (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) (PCR a fluorescenza)
Epidemiologia
Gli antibiotici carbapenemici sono antibiotici β-lattamici atipici con lo spettro antibatterico più ampio e la più forte attività antibatterica.Grazie alla sua stabilità alle β-lattamasi e alla bassa tossicità, è diventato uno dei farmaci antibatterici più importanti per il trattamento delle infezioni batteriche gravi.I carbapenemi sono altamente stabili alle β-lattamasi a spettro esteso mediate da plasmidi (ESBL), ai cromosomi e alle cefalosporinasi mediate da plasmidi (enzimi AmpC).
Canale
Miscela PCR 1 | Miscela PCR 2 | |
FAM | IMP | VIM |
VIC/ESAG | Controllo interno | Controllo interno |
CY5 | NDM | KPC |
ROX | OXA48
| OXA23 |
Parametri tecnici
Magazzinaggio | ≤-18℃ |
Data di scadenza | 12 mesi |
Tipo di campione | Espettorato, colonie pure, tampone rettale |
Ct | ≤36 |
CV | ≤5,0% |
LoD | 103UFC/mL |
Specificità | a) Il kit rileva i riferimenti negativi aziendali standardizzati e i risultati soddisfano i requisiti dei riferimenti corrispondenti. b) I risultati del test di reattività crociata mostrano che questo kit non presenta reazioni crociate con altri patogeni respiratori, come Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Staphylococcus aureus, Klebsiella oxytoca, Haemophilus influenzae, Acinetobacter junii, Acinetobacter haemolyticus, Legionella pneumophila, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens, Candida albicans, Chlamydia pneumoniae, Adenovirus respiratorio, Enterococcus o campioni contenenti altri geni resistenti ai farmaci CTX, mecA, SME, SHV, TEM, ecc. c) Anti-interferenza: Mucina, Minociclina, Gentamicina, Clindamicina, Imipenem, Cefoperazone, Meropenem, Ciprofloxacina cloridrato, Levofloxacina, Acido clavulanico, Roxitromicina sono selezionati per il test di interferenza e i risultati mostrano che le sostanze interferenti sopra menzionate non hanno alcuna reazione interferente. al rilevamento dei geni di resistenza ai carbapenemi KPC, NDM, OXA48, OXA23, VIM e IMP. |
Strumenti applicabili | Sistemi Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR Sistemi PCR in tempo reale QuantStudio®5 Sistemi PCR in tempo reale SLAN-96P (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) Sistema PCR in tempo reale LightCycler®480 Sistema di rilevamento PCR in tempo reale LineGene 9600 Plus (FQD-96A,Hangzhoutecnologia Bioer) Ciclatore termico quantitativo in tempo reale MA-6000 (Suzhou Molarray Co., Ltd.) Sistema PCR in tempo reale BioRad CFX96 Sistema PCR in tempo reale BioRad CFX Opus 96 |
Flusso di lavoro
Opzione 1.
Reagente di estrazione consigliato: Kit Macro e Micro-Test General DNA/RNA (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (che può essere utilizzato con l'estrattore automatico di acidi nucleici Macro e Micro-Test (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) di Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd.. Aggiungere 200μL di soluzione salina normale a il tallo precipita.I passaggi successivi devono seguire le istruzioni per l'estrazione e il volume di eluizione consigliato è100μL.
Opzione 2.
Reagente di estrazione consigliato: Nucleic Acid Extraction or Purification Reagent (YDP302) di Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. L'estrazione deve essere avviata in stretta conformità con il passaggio 2 delle istruzioni per l'uso (aggiungere 200μL di tampone GA al precipitato di tallo , e agitare finché il tallo non sia completamente sospeso).Utilizzare acqua priva di RNasi/DNasi per l'eluizione e il volume di eluizione consigliato è 100μL.
Opzione 3.
Reagente di estrazione consigliato: reagente di rilascio dei campioni per macro e microtest.Il campione di espettorato deve essere lavato aggiungendo 1 ml di soluzione salina al precipitato di tallo trattato sopra menzionato, centrifugato a 13.000 giri/min per 5 minuti e il surnatante viene scartato (conservare 10-20 µL di surnatante).Per colonie pure e tamponi rettali, aggiungere 50μL di reagente di rilascio del campione direttamente al suddetto precipitato di tallo trattato e i passaggi successivi devono essere estratti secondo le istruzioni per l'uso.