Gene di resistenza ai carbapenemi (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
Nome del prodotto
Kit di rilevamento del gene di resistenza ai carbapenemi HWTS-OT045 (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) (PCR a fluorescenza)
Epidemiologia
Gli antibiotici carbapenemici sono antibiotici β-lattamici atipici con il più ampio spettro antibatterico e la più forte attività antibatterica. Grazie alla loro stabilità alle β-lattamasi e alla bassa tossicità, sono diventati uno dei farmaci antibatterici più importanti per il trattamento delle infezioni batteriche gravi. I carbapenemi sono altamente stabili alle β-lattamasi a spettro esteso (ESBL) mediate da plasmidi, ai cromosomi e alle cefalosporinasi mediate da plasmidi (enzimi AmpC).
Canale
| PCR-Mix 1 | PCR-Mix 2 | |
| FAM | IMP | VIM |
| VIC/HEX | Controllo interno | Controllo interno |
| CY5 | NDM | KPC |
| ROX | OXA48
| OXA23 |
Parametri tecnici
| Magazzinaggio | ≤-18℃ |
| Durata di conservazione | 12 mesi |
| Tipo di campione | Espettorato, colonie pure, tampone rettale |
| Ct | ≤36 |
| CV | ≤5,0% |
| LoD | 103UFC/mL |
| Specificità | a) Il kit rileva i riferimenti negativi standardizzati dell'azienda e i risultati soddisfano i requisiti dei riferimenti corrispondenti. b) I risultati del test di reattività crociata mostrano che questo kit non presenta alcuna reazione crociata con altri patogeni respiratori, come Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Staphylococcus aureus, Klebsiella oxytoca, Haemophilus influenzae, Acinetobacter junii, Acinetobacter haemolyticus, Legionella pneumophila, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens, Candida albicans, Chlamydia pneumoniae, adenovirus respiratorio, Enterococcus o campioni contenenti altri geni resistenti ai farmaci CTX, mecA, SME, SHV, TEM, ecc. c) Anti-interferenza: per il test di interferenza vengono selezionati mucina, minociclina, gentamicina, clindamicina, imipenem, cefoperazone, meropenem, ciprofloxacina cloridrato, levofloxacina, acido clavulanico, roxitromicina e i risultati mostrano che le sostanze interferenti sopra menzionate non presentano alcuna reazione interferente al rilevamento dei geni di resistenza ai carbapenemi KPC, NDM, OXA48, OXA23, VIM e IMP. |
| Strumenti applicabili | Sistemi PCR in tempo reale Applied Biosystems 7500 Sistemi PCR in tempo reale QuantStudio®5 Sistemi PCR in tempo reale SLAN-96P (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) Sistema PCR in tempo reale LightCycler®480 Sistema di rilevamento PCR in tempo reale LineGene 9600 Plus (FQD-96A，HangzhouTecnologia Bioer) Termociclatore quantitativo in tempo reale MA-6000 (Suzhou Molarray Co., Ltd.) Sistema PCR in tempo reale BioRad CFX96 Sistema PCR in tempo reale BioRad CFX Opus 96 |
Flusso di lavoro
Opzione 1.
Reagente di estrazione consigliato: kit generale DNA/RNA Macro & Micro-Test (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (utilizzabile con l'estrattore automatico di acidi nucleici Macro & Micro-Test (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) di Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd.. Aggiungere 200 μL di soluzione fisiologica al precipitato del tallo. I passaggi successivi devono seguire le istruzioni per l'estrazione e il volume di eluizione raccomandato è100μL.
Opzione 2.
Reagente di estrazione consigliato: Reagente di estrazione o purificazione di acidi nucleici (YDP302) di Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. L'estrazione deve essere avviata seguendo scrupolosamente il passaggio 2 delle istruzioni per l'uso (aggiungere 200 μL di tampone GA al precipitato del tallo e agitare fino a completa sospensione del tallo). Utilizzare acqua priva di RNasi/DNasi per l'eluizione; il volume di eluizione raccomandato è di 100 μL.
Opzione 3.
Reagente di estrazione raccomandato: reagente di rilascio del campione per macro e micro-test. Il campione di espettorato deve essere lavato aggiungendo 1 ml di soluzione fisiologica al precipitato di tallo trattato sopra menzionato, centrifugato a 13000 giri/min per 5 minuti e il surnatante viene scartato (conservare 10-20 µl di surnatante). Per le colonie pure e il tampone rettale, aggiungere 50 µl di reagente di rilascio del campione direttamente al precipitato di tallo trattato sopra menzionato e i passaggi successivi devono essere estratti secondo le istruzioni per l'uso.
