Gene di resistenza ai carbapenemi (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
Nome del prodotto
Kit HWTS-OT045 per la rilevazione del gene di resistenza ai carbapenemi (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) (PCR a fluorescenza)
Epidemiologia
I carbapenemi sono antibiotici β-lattamici atipici con il più ampio spettro antibatterico e la più forte attività antibatterica. Grazie alla loro stabilità alle β-lattamasi e alla bassa tossicità, sono diventati uno dei farmaci antibatterici più importanti per il trattamento delle infezioni batteriche gravi. I carbapenemi sono altamente stabili alle β-lattamasi a spettro esteso (ESBL) mediate da plasmidi, ai cromosomi e alle cefalosporinasi mediate da plasmidi (enzimi AmpC).
Canale
| Miscela PCR 1 | PCR-Mix 2 | |
| FAM | Imp | VIM |
| VIC/HEX | Controllo interno | Controllo interno |
| CY5 | NDM | KPC |
| ROX | OXA48
| OXA23 |
Parametri tecnici
| Magazzinaggio | ≤-18℃ |
| durata di conservazione | 12 mesi |
| Tipo di campione | Espettorato, colonie pure, tampone rettale |
| Ct | ≤36 |
| CV | ≤5,0% |
| LoD | 103UFC/mL |
| Specificità | a) Il kit rileva i riferimenti negativi standardizzati dell'azienda e i risultati soddisfano i requisiti dei riferimenti corrispondenti. b) I risultati del test di reattività crociata dimostrano che questo kit non presenta reazioni crociate con altri patogeni respiratori, come Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Staphylococcus aureus, Klebsiella oxytoca, Haemophilus influenzae, Acinetobacter junii, Acinetobacter haemolyticus, Legionella pneumophila, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens, Candida albicans, Chlamydia pneumoniae, adenovirus respiratorio, Enterococcus o campioni contenenti altri geni di resistenza ai farmaci CTX, mecA, SME, SHV, TEM, ecc. c) Anti-interferenza: Mucina, Minociclina, Gentamicina, Clindamicina, Imipenem, Cefoperazone, Meropenem, Ciprofloxacina Cloridrato, Levofloxacina, Acido Clavulanico, Roxitromicina sono stati selezionati per il test di interferenza e i risultati mostrano che le suddette sostanze interferenti non hanno reazioni interferenti con il rilevamento dei geni di resistenza ai carbapenemi KPC, NDM, OXA48, OXA23, VIM e IMP. |
| Strumenti applicabili | Sistemi PCR in tempo reale Applied Biosystems 7500 Sistemi PCR in tempo reale QuantStudio®5 Sistemi PCR in tempo reale SLAN-96P (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) Sistema PCR in tempo reale LightCycler®480 Sistema di rilevamento PCR in tempo reale LineGene 9600 Plus (FQD-96AItalianoHangzhouTecnologia Bioer) Termociclatore quantitativo in tempo reale MA-6000 (Suzhou Molarray Co., Ltd.) Sistema PCR in tempo reale BioRad CFX96 Sistema PCR in tempo reale BioRad CFX Opus 96 |
Flusso di lavoro
Opzione 1.
Reagente di estrazione consigliato: Macro & Micro-Test General DNA/RNA Kit (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (che può essere utilizzato con l'estrattore automatico di acidi nucleici Macro & Micro-Test (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) di Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd.. Aggiungere 200 μL di soluzione fisiologica al precipitato del tallo. I passaggi successivi devono seguire le istruzioni per l'estrazione e il volume di eluizione raccomandato è100 μL.
Opzione 2.
Reagente di estrazione raccomandato: Reagente per l'estrazione o la purificazione degli acidi nucleici (YDP302) di Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. L'estrazione deve essere avviata seguendo scrupolosamente il passaggio 2 delle istruzioni per l'uso (aggiungere 200 μL di tampone GA al precipitato del tallo e agitare fino a completa sospensione del tallo). Utilizzare acqua priva di RNasi/DNasi per l'eluizione e il volume di eluizione raccomandato è di 100 μL.
Opzione 3.
Reagente di estrazione raccomandato: Macro & Micro-Test Sample Release Reagent. Il campione di espettorato deve essere lavato aggiungendo 1 ml di soluzione fisiologica al precipitato di tallo trattato come sopra descritto, centrifugato a 13000 giri/min per 5 minuti e il surnatante deve essere scartato (conservare 10-20 µl di surnatante). Per colonie pure e tamponi rettali, aggiungere 50 µl di reagente di rilascio del campione direttamente al precipitato di tallo trattato come sopra descritto e le fasi successive devono essere eseguite secondo le istruzioni per l'uso.
